Teses de doutorado
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Ítem Acceso Abierto Pesquisa de Helicobacter spp. no fígado de pacientes submetidos à biópsia hepática para esclarecimento diagnóstico(2006-09-19) Silva, Luciana DinizDNA de Helicobacter tem sido observado no fígado de pacientes com cirrose e hepatocarcinoma e uma possível participação como fator de risco tem sido aventada. Na maioria dos trabalhos foram avaliados pacientes com hepatite viral e não há estudos incluindo pacientes com hepatopatias de outras etiologias como álcool e hepatite auto-imune. No período entre março de 2000 e dezembro de 2004, foram estudados, prospectivamente, 125 pacientes (65 do sexo masculino; média de idade de 52,4 + 15,7 anos; faixa etária de 18 a 93 anos) com doenças hepáticas primárias ou metastáticas submetidos à biópsia hepática para esclarecimento diagnóstico. Fragmentos hepáticos foram obtidos por via transparietal ou laparoscópica. A pesquisa de Helicobacter no fragmento hepático foi feita por cultura e PCRaninhada, empregando iniciadores específicos para o gene que codifica o RNAr 16S e para o gene ureA. A investigação da infecção gástrica pelo Helicobacter pylori foi feita por teste respiratório com uréia marcada com 13C e pela pesquisa de anticorpos anti-H. pylori pelo método de ELISA. Com base em estudos sorológicos, associando a infecção crônica pelo vírus da hepatite B com taxas mais elevadas de infecção gástrica pelo H. pylori, marcadores da infecção pelo VHB, também, foram investigados nas amostras de soro de todos os pacientes incluídos no estudo. Amostras de Helicobacter foram isoladas, pela primeira vez, do fígado humano em três pacientes e, foram identificadas em espécie por microscopia eletrônica, imunohistoquímica, testes bioquímicos e sequenciamento do gene que codifica o RNAr 16S. DNA de Helicobacter foi detectado em 51 (40,8%) fragmentos hepáticos. O sequenciamento de todos os amplicons mostrou homologia com H. pylori igual ou superior a 99%. Em análise multivariada, a presença da bactéria no fígado associou-se, de maneira inédita, positivamente à pancreatopatias (especialmente neoplasia), bem como à infecção passada ou atual pelo VHB, mas não com hepatopatia alcoólica. Ainda, a presença de DNA de Helicobacter no fígado associou-se à infecção gástrica pelo H. pylori, achado que fortalece a hipótese de colonização hepática por bactérias oriundas do estômago. Por outro lado, não foi verificada associação entre presença do microrganismo no fígado e alterações histopatológicas hepáticas, mas foi demonstrada, pela primeira vez, associação entre lesão necroinflamatória do fígado e infecção gástrica pela bactéria. Em conjunto, esses achados sugerem que o fígado pode ser colonizado pelo H. pylori, confirmam resultados anteriores (retrospectivos) e demonstram associações com outras doenças. Entretanto, se a presença do microrganismo no fígado é primária ou secundária ou se contribui para um desfecho desfavorável das doenças hepáticas, são fatos que necessitam ainda ser esclarecidos